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403 - Instalación de Cultivos Celulares con Seguridad Biológica Tipo II


OPI: IDIPHIM
Centro:
Departamento: Plataformas Comunes
Contacto: Silvia Rosado García
Dirección: C/ Joaquín Rodrigo 2
Código Postal: 28222
Localidad: Majadahonda
Teléfono: 91 191 67 68
Fax:
e-mail: srosado@idiphim.org
web: www.investigacionpuertadehierro.com/index.php/areas-comunes/core-facilities/cultivos-celulares
Categoría: ( Sin evaluar )
Información adicional: El uso de sistemas de cultivos celulares in vitro, supone una plataforma tecnológica esencial para el desarrollo de múltiples investigaciones. Se trata de una herramienta imprescindible para la evaluación de los mecanismos moleculares y celulares que suceden en todo proceso biológico. Los cultivos de células in vitro consisten en un sistema formado por células provenientes de un órgano o tejido, normal o tumoral, que son mantenidas en medios de cultivo de composición química definida, condiciones de temperatura, pH, concentración de CO2 y humedad controladas. De esta forma se aseguran su supervivencia y proliferación, manteniendo todas sus funciones metabólicas de forma semejante a las que tenían en el huésped. La Sala de Cultivos Celulares de la Fundación para la Investigación Biomédica del Hospital Universitario Puerta de Hierro Majadahonda, cuenta desde el 2015 con la resolución favorable por la Dirección general del Medio Ambiente del uso de las instalaciones para el desarrollo de actividades de utilización confinada con organismos de riesgo bajo (Tipo II). Del mismo modo la instalación está autorizada para realizar transfecciones celulares con vectores plasmídicos y la transducción celular con vectores lentivirales defectivos en replicación. Dicha información puede consultarse en la página web del Ministerio de Medio Ambiente: http://www.magrama.gob.es/es/calidad-y-evaluacion-ambiental/temas/biotecnologia/organismos-modificados-geneticamente-omg-/notificaciones-y-autorizaciones/uso_confinado.aspx La instalación dispone de toda la infraestructura necesaria para el aislamiento de células y su cultivo: a partir de sangre periférica, explantos y disgregación tisular, el mantenimiento, expansión y criopreservación de múltiples líneas celulares establecidas y cultivos primarios humanos y murinos. Los usuarios pueden realizar seguimiento del cultivo celular, estudios de: activación celular (mecanismos de entrada, transporte y liberación de calcio, detección de especies reactivas de oxígeno etc...), proliferación celular (ensayo MTT), muerte celular (ensayo apoptosis, citotoxicidad) y migración (ensayo herida). Por último, se pueden realizar modificaciones genéticas de dichos cultivos celulares mediante transfecciones celulares (formación de precipitados de fosfato cálcico o liposomas), transducciones celulares con partículas virales lentivirales defectivas en replicación. La Unidad oferta formación y entrenamiento básico técnico en el manejo y experimentación en el Laboratorio de Cultivos Celulares para cualquier usuario de nueva incorporación o que carezca de experiencia en este campo, además de prestar apoyo y asesoramiento para la realización de ensayos más específicos

Datos Ensayos

Tipo
Producto
Nombre
Método
Biológicos Tejidos y cultivos celulares Activación celular Liberación de Calcio, producción de especies reactivas de oxígeno etc
Biológicos Muestras Biológicas Aislamiento de células para su cultivo: aislamiento de linajes celulares a partir de sangre periférica, explantos Gradiente de densidad, explantos, disgregación mecánica y enzimática de tejidos
Biológicos Tejidos y cultivos celulares Ensayos celulares: Migración Celular Ensayo herida
Biológicos Tejidos y cultivos celulares Ensayos de detección de micoplasmas Amplificación de una región conservada del ARNribosómico 16S por PCR
Biológicos Tejidos y cultivos celulares Mantenimiento, expansión y criopreservación de cultivos primarios Cultivos primarios in vitro en condiciones físicas y químicas controladas
Biológicos Tejidos y cultivos celulares Mantenimiento, expansión y criopreservación de líneas celulares humanas y murinas Cultivos de líneas células establecidas in vitro en condiciones físicas y químicas controladas
Biológicos Tejidos y cultivos celulares Modificación genética celular: transducciones celulares con partículas virales Infección celular con partículas lentivirales
Biológicos Tejidos y cultivos celulares Modificación genética celular: transfección Formación de precipitados de fosfato cálcico, liposomas
Biológicos Tejidos y cultivos celulares Muerte celular Ensayos de citotoxicidad, apoptosis
Biológicos Tejidos y cultivos celulares Proliferación celular Ensayo MTT

Datos Equipos

Nombre
Rango
Incer
Observaciones
Incubadores Serie 8000WJ 3429, Thermo Scientific Temperatura 37ºC, 5% CO2 y 70% humedad relativa - Mantenimiento del cultivo celular
Cabinas de flujo laminar de Seguridad Biológica: Telstar Bio II A Digital Sight Camara Control Unit DS-L2 (DS-Fi1) Nikon - Manipulación de cultivo celular y reactivos
Microscopio invertido: Nikon Eclipse TS100 con iluminación LED Objetivos 10x, 20x y 40x - Observación morfológica del cultivo celular
Microscopio invertido Nikon Ti-S Eclipse asociado a una unidad de epifluorescencia (Intensilight C- Objetivos 10x, 20x y 40x Fluorescencia: Azul, Verde y Roja - Observación celular e investigación
Hermle Z300 Centrifuga Velocidad:hasta 13.500 rpm/17310g - Obtención de pellets celulares, gradiente de densidad, lavados celulares etc..
Labnet Spectrafuge 24D Microcentrifuge Velocidad: 13.500 rpm/16276g, tubos: 0,2ml hasta 2ml - Aplicaciones de biología molecular
Vortex VELP Scientifica ZX3 Velocidad: 40Hertz - Homogenización de muestras y reactivos
Equipo de Esterilización: Presoclave II (P Selecta) Rango de Temperatura: 115ºC-134ºC, Presión: 0,62-2bares - Esterilización de reactivos y material de laboratorio
Sistema de purificación de Agua Ultrapura Tipo I (Grado Reactivo) Wasserlab Pureza: Grado Reactivo:18.2 M?·cm a 25 ºC, COT < 10 ppb y recuento bacteriano <=1 ufc/ml - Preparación de reactivos
Ultracongelador -80ºC Thermo Scientific Forma 900 Rango de Temperatura: -50ºC/-80ºC - Almacenamiento: aditivos del medio (suero, glutamina, antibióticos,...),factores de crecimiento, mitogenos, inductores, partículas virales etc.
Contenedor de Nitrógeno Líquido: Air Liquide Espace 151 Liquide Capacidad de nitrógeno líquido(l): fase líquida: 200, fase gaseosa:33 - Criopreservación de células y tejidos
Digital Sight Camara Control Unit DS-L2 (DS-Fi1) Nikon 2/3 pulgadas, color, resolución: 5,24megapixel - Captura de imágenes

Códigos Cnae

Código
Descripción
73 Investigación y desarrollo
85.1 Actividades sanitarias

Áreas Científicas

Código
Descripción
A- Biología, Medicina
A-14 Biología celular