{"id":130999,"date":"2010-09-26T18:31:53","date_gmt":"2010-09-26T17:31:53","guid":{"rendered":"http:\/\/www.madrimasd.org\/blogs\/microbiologia\/?p=130999"},"modified":"2010-10-02T15:45:48","modified_gmt":"2010-10-02T14:45:48","slug":"un-paso-mas-hacia-el-diagnostico-rapido-de-la-tuberculosis","status":"publish","type":"post","link":"https:\/\/www.madrimasd.org\/blogs\/microbiologia\/2010\/09\/26\/130999","title":{"rendered":"Un paso m\u00e1s hacia el diagn\u00f3stico r\u00e1pido de la tuberculosis"},"content":{"rendered":"<p><iframe src=\"http:\/\/www.facebook.com\/plugins\/like.php?href=http%3A%2F%2Fwww.madrimasd.org%2Fblogs%2Fmicrobiologia%2F2010%2F09%2F26%2F130999&amp;layout=box_count&amp;show_faces=true&amp;width=450&amp;action=like&amp;colorscheme=light&amp;height=65\" scrolling=\"no\" frameborder=\"0\" style=\"border:none; overflow:hidden; width:450px; height:65px;\" allowTransparency=\"true\"><\/iframe><br \/>\nautora: Cristina Ortiz *<\/p>\n<p style=\"text-align: justify;\"><strong>Un grupo de cient\u00edficos de diferentes instituciones en Suiza, Alemania, Sud\u00e1frica, Per\u00fa, India, <a href=\"http:\/\/es.wikipedia.org\/wiki\/Azerbaiy\u00e1n\">Azerbaiy\u00e1n<\/a>, y Estados Unidos, acaba de publicar en <a href=\"http:\/\/www.nejm.org\/doi\/full\/10.1056\/NEJMoa0907847\">The New England Journal of Medicine<\/a> la comprobaci\u00f3n de la eficacia de un nuevo m\u00e9todo autom\u00e1tico para detectar en no m\u00e1s de dos horas si una persona est\u00e1 infectada por el bacilo de Koch, <em>Mycobacterium tuberculosis<\/em> (MTB), causante de la tuberculosis. El m\u00e9todo permite adem\u00e1s detectar si la cepa que infecta al paciente es resistente a rifampicina (RIF), uno de los antibi\u00f3ticos de primera l\u00ednea usados contra la tuberculosis.<\/strong><\/p>\n<p style=\"text-align: justify;\"><img decoding=\"async\" class=\"alignnone size-full wp-image-131001\" title=\"figure2\" src=\"https:\/\/www.madrimasd.org\/blogs\/microbiologia\/files\/2010\/09\/figure2.jpg\" alt=\"figure2\" width=\"483\" height=\"399\" srcset=\"https:\/\/www.madrimasd.org\/blogs\/microbiologia\/files\/2010\/09\/figure2.jpg 805w, https:\/\/www.madrimasd.org\/blogs\/microbiologia\/files\/2010\/09\/figure2-300x247.jpg 300w\" sizes=\"(max-width: 483px) 100vw, 483px\" \/><\/p>\n<p style=\"text-align: justify;\"><span style=\"color: #008000;\"><strong>El \u201cXpert MTB\/RIF\u201d es como se ha llamado la m\u00e1quina que permite en no  mas de dos horas diagnosticar la tuberculosis. <\/strong>Para iniciar el  procedimiento se obtiene una muestra de esputo del paciente y se  inactiva con un reactivo especialmente formulado para matar la bacteria,  licuarla y estabilizar los componentes. La manipulaci\u00f3n de la muestra  es m\u00ednima, basta con agitar la mezcla, dejarla reposar un cuarto de hora  y volver a agitarla. De esa mezcla, ya inocua, se retira un peque\u00f1o volumen, de 2 a  3 mililitros, o sea lo que ser\u00eda una cucharada sopera, y se introducen en   un cartucho en el que se encuentran todos los reactivos necesarios  para realizar el an\u00e1lisis. A partir de ah\u00ed ya todo lo hace la m\u00e1quina,  que tras una hora y tres cuartos facilita el resultado, tanto en una  pantalla como en una impresora.<\/span><\/p>\n<p style=\"text-align: justify;\"><!--more--><em>M. tuberculosis<\/em>, la bacteria causante de la tuberculosis, mata aproximadamente a dos millones de personas al a\u00f1o. El control global de la misma se hace cada vez m\u00e1s dif\u00edcil por la aparici\u00f3n de cepas multiresistentes a los antibi\u00f3ticos y porque las personas infectadas por VIH (el virus del SIDA) son especialmente propensas a desarrollar la enfermedad. Pero tambi\u00e9n porque el <a href=\"https:\/\/www.madrimasd.org\/blogs\/microbiologia\/2009\/12\/23\/130394\">diagn\u00f3stico de la infecci\u00f3n<\/a> es muy laborioso y t\u00e9cnicamente complejo. La necesidad de encontrar un nuevo m\u00e9todo de diagn\u00f3stico que permita una detecci\u00f3n temprana de la enfermedad, es por ello esencial para reducir la tasa de muertes e interrumpir su transmisi\u00f3n.<\/p>\n<p style=\"text-align: justify;\">El \u201cXpert MTB\/RIF\u201d ha sido probado en 1730 pacientes entre India, Sud\u00e1frica, Azerbaiy\u00e1n y Per\u00fa, pa\u00edses en los que se concentra la mayor tasa de prevalencia de tuberculosis. Las muestras que se eligieron para comprobar el \u201cXpert MTB\/RIF\u201d fueron elegidas entre pacientes con sospecha de padecer tuberculosis multiresistente. En los pacientes de Sud\u00e1frica un 70% de casos van acompa\u00f1ados por la infecci\u00f3n con VIH; en la India el 50% de los casos son multiresistentes a los antibi\u00f3ticos. El test ha presentado una sensibilidad y especificidad en la detecci\u00f3n de la tuberculosis y resistencia a rifampicina del 98%   y ofrece los resultados en  unas 2 horas y con un tiempo de manipulaci\u00f3n de muestra por parte del personal sanitario de menos de 15 minutos.<\/p>\n<p style=\"text-align: justify;\">Tradicionalmente la tuberculosis se diagnostica por crecimiento selectivo del bacilo del esputo en un medio de cultivo, el llamado <a href=\"http:\/\/en.wikipedia.org\/wiki\/Lowenstein-Jensen_medium\">medio Lowenstein-Jensen<\/a> y detecci\u00f3n al microscopio tras un proceso de tinci\u00f3n espec\u00edfico, la <a href=\"http:\/\/en.wikipedia.org\/wiki\/Ziehl-Neelsen_stain\">tinci\u00f3n de Ziehl-Neelsen<\/a>. El bacilo permanece as\u00ed activo durante el suficiente tiempo como para necesitar que el diagn\u00f3stico precise de instalaciones adecuadas para impedir la infecci\u00f3n del personal t\u00e9cnico sanitario.<\/p>\n<p style=\"text-align: justify;\">Por el contrario, en el \u201cXpert MTB\/RIF\u201d, el \u00fanico paso que se realiza de forma manual, es la adici\u00f3n del reactivo bactericida a la muestra (esputo) justo antes de introducirlo en la m\u00e1quina. La utilizaci\u00f3n del diagn\u00f3stico por el \u201cXpert MTB\/RIF\u201d elimina as\u00ed el inconveniente de necesitar laboratorios de alta bioseguridad ya que todas las reacciones se realizan despu\u00e9s de inactivar los g\u00e9rmenes presentes en el esputo. El test autom\u00e1tico MTB\/RIF integra una modificaci\u00f3n de la reacci\u00f3n convencional de polimerasa en cadena, PCR, con la que se reduce la contaminaci\u00f3n del producto amplificado, en este caso el gen llamado <em>rpoB<\/em> ; mutaciones en este gen, que codifica para la subunidad beta de la ARN polimerasa, est\u00e1n implicadas en la resistencia a rifampicina. Contiene adem\u00e1s todos los reactivos necesarios para la lisis bacteriana, extracci\u00f3n del ADN y detecci\u00f3n del producto amplificado.<\/p>\n<p style=\"text-align: justify;\">En el \u201cXpert MTB\/RIF\u201d los pasos finales del ensayo, los que dependen de la reacci\u00f3n en cadena de la polimerasa, un procedimiento muy sensible pero que es muy propenso a las contaminaciones de la muestra, tienen lugar en un recipiente herm\u00e9ticamente sellado, lo que elimina la posibilidad de contaminaci\u00f3n, y por ello de falsos positivos. Otra ventaja del \u201cXpert MTB\/RIF\u201d es que para su manipulaci\u00f3n no se necesita personal tan especializado. Esto supone una gran ventaja para realizar el diagn\u00f3stico en las  \u00e1reas rurales mal comunicadas y con pocos recursos de los pa\u00edses con mayor \u00edndice de esta enfermedad, puesto que el entrenamiento que se necesita para llevar a cabo el test es m\u00ednimo. Por otra parte, el tiempo que tarda la m\u00e1quina en dar el resultado del an\u00e1lisis es de menos de 2 horas, esto es otra ventaja en comparaci\u00f3n con la t\u00e9cnica utilizada hoy en d\u00eda, el crecimiento de la muestra en medio selectivo y la tinci\u00f3n de Ziehl-Neelsen que, adem\u00e1s del peligro que acarrea su manipulaci\u00f3n, tarda como m\u00ednimo unas 2 semanas en obtener resultados.<\/p>\n<p style=\"text-align: justify;\">El coste elevado de la m\u00e1quina que realiza el diagn\u00f3stico y el de los cartuchos de un solo uso, as\u00ed como que se necesita calibrarla cada a\u00f1o, son todav\u00eda los mayores escollos que aparecen para que su uso se extienda en las regiones m\u00e1s desfavorecidas, precisamente en las que mayores problemas causa la tuberculosis. A\u00fan as\u00ed, ser\u00eda posiblemente m\u00e1s barato tener esta m\u00e1quina autom\u00e1tica en centros sanitarios estrat\u00e9gicamente seleccionados y establecer sistemas eficaces para el transporte de las muestras inactivadas que disponer del personal entrenado y de las instalaciones materiales y reactivos que se necesitan hoy en d\u00eda para cultivar las muestras de los pacientes y comprobar si los bacilos que pueden encontrarse son sensibles a los antibi\u00f3ticos. De esta manera podemos pensar que ya se acerca el momento en el que la lentitud en el diagn\u00f3stico deje de ser uno de los principales agravantes de la tuberculosis. Posiblemente desterrar la pobreza, la principal causa que contribuye a esta lacra, lleve m\u00e1s tiempo.<\/p>\n<p><span style=\"color: #800000;\"><strong>REFERENCIA:<\/strong><\/span><\/p>\n<p style=\"text-align: justify;\">Boehme CC, Nabeta P, Hillemann D, Nicol MP, Shenai S, Krapp F, Allen J, Tahirli R, Blakemore R, Rustomjee R, Milovic A, Jones M, O&#8217;Brien SM, Persing DH, Ruesch-Gerdes S, Gotuzzo E, Rodrigues C, Alland D, Perkins MD. 2010. Rapid molecular detection of tuberculosis and rifampin resistance. <em>N Engl J Med<\/em>. <strong>363<\/strong>:1005-1015.<\/p>\n<p style=\"text-align: justify;\">* Cristina Ortiz es Licenciada en Qu\u00edmicas por la Universidad Aut\u00f3noma de Madrid y realiza su tesis doctoral en el Departamento de Biotecnolog\u00eda Microbiana del Centro Nacional de Biotecnolog\u00eda.<\/p>\n<p style=\"text-align: justify;\"><img decoding=\"async\" class=\"alignnone size-full wp-image-130921\" title=\"suple-noti\" src=\"https:\/\/www.madrimasd.org\/blogs\/microbiologia\/files\/2010\/05\/suple-noti.gif\" alt=\"suple-noti\" width=\"211\" height=\"63\" \/> Foro del d\u00eda 27 de septiembre de 2010 en <a href=\"http:\/\/www.madrimasd.org\/informacionidi\/noticias\/noticia.asp?id=45502&amp;origen=notiweb\">notiweb<\/a><\/p>\n","protected":false},"excerpt":{"rendered":"<p>autora: Cristina Ortiz * Un grupo de cient\u00edficos de diferentes instituciones en Suiza, Alemania, Sud\u00e1frica, Per\u00fa, India, Azerbaiy\u00e1n, y Estados Unidos, acaba de publicar en The New England Journal of Medicine la comprobaci\u00f3n de la eficacia de un nuevo m\u00e9todo autom\u00e1tico para detectar en no m\u00e1s de dos horas si una persona est\u00e1 infectada por el bacilo de Koch, Mycobacterium tuberculosis (MTB), causante de la tuberculosis. 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