{"id":131706,"date":"2011-12-16T13:50:06","date_gmt":"2011-12-16T12:50:06","guid":{"rendered":"http:\/\/www.madrimasd.org\/blogs\/remtavares\/?p=131706"},"modified":"2011-12-16T13:50:06","modified_gmt":"2011-12-16T12:50:06","slug":"whole-effluent-assessment","status":"publish","type":"post","link":"https:\/\/www.madrimasd.org\/blogs\/remtavares\/2011\/12\/16\/131706","title":{"rendered":"Whole Effluent Assessment"},"content":{"rendered":"<p>Este art\u00edculo es un resumen de gu\u00eda pr\u00e1ctica publicada por la comisi\u00f3n OSPAR para la establecer unas pautas que pretenden acercarse a la caracterizaci\u00f3n de los efluentes acuosos como un \u201ctodo\u201d (<strong>W<\/strong>hole <strong>E<\/strong>ffluent <strong>A<\/strong>ssessment, WEA) en vez de la forma m\u00e1s cl\u00e1sica de identificar compuesto por compuesto (single substances approach).<\/p>\n<p>Alice Luminita PETRE y Jose Antonio PERDIG\u00d3N MEL\u00d3N<\/p>\n<p>Departamento de Qu\u00edmica Anal\u00edtica e Ingenier\u00eda Qu\u00edmica, UAH<span id=\"mce_marker\">\u00a0<\/span><\/p>\n<p class=\"MsoNormal\" style=\"margin: 0cm 0cm 0pt;\"><span style=\"color: brown; mso-ansi-language: ES-TRAD;\" lang=\"ES-TRAD\"><span style=\"font-size: small;\"><span style=\"font-family: Times New Roman;\">[Alice Luminita PETRE y Jose Antonio PERDIG\u00d3N MEL\u00d3N. <\/span><\/span><\/span><span style=\"font-family: 'Times New Roman'; color: brown; font-size: 12pt; mso-fareast-font-family: 'Times New Roman'; mso-ansi-language: ES-TRAD; mso-fareast-language: ES; mso-bidi-language: AR-SA;\" lang=\"ES-TRAD\">Departamento de Qu\u00edmica Anal\u00edtica e Ingenier\u00eda Qu\u00edmica, UAH]<\/span><\/p>\n<p><!--more--><\/p>\n<p>La OSPAR Commission \u201cOSPAR Commission, protecting and conserving the North-East Atlantic and its resources\u201d <a href=\"http:\/\/www.ospar.org\/\">http:\/\/www.ospar.org\/<\/a> fue creada en 1972 con el fin de incentivar la cooperaci\u00f3n para la protecci\u00f3n de la vida marina en el Atl\u00e1ntico Noreste. La comisi\u00f3n est\u00e1 formada por 15 pa\u00edses de Europa cuyas costas y vertidos pueden afectar a la zona del tratado. Los pa\u00edses firmantes son, B\u00e9lgica, Dinamarca, Finlandia, Francia, Alemania, Islandia, Irlanda, Luxemburgo, Holanda, Noruega, Portugal, Espa\u00f1a, Suiza, Suecia y Reino Unido. Aunque Finlandia no pertenece a la costa oeste de Europa algunos de sus r\u00edos fluyen Mar de Barent e hist\u00f3ricamente ha estado involucrada en los esfuerzos para el control de vertidos de sustancias peligrosas en el mar del Norte y en el Oc\u00e9ano Atl\u00e1ntico. Luxemburgo y Suiza son pa\u00edses firmantes por su influencia de sus vertidos sobre el rio Rhin.<\/p>\n<p>Este art\u00edculo es un resumen de gu\u00eda pr\u00e1ctica publicada por la comisi\u00f3n OSPAR para la establecer unas pautas que pretenden acercarse a la caracterizaci\u00f3n de los efluentes acuosos como un \u201ctodo\u201d (<strong>W<\/strong>hole <strong>E<\/strong>ffluent <strong>A<\/strong>ssessment &#8211; WEA) en vez de la forma m\u00e1s cl\u00e1sica de identificar compuesto por compuesto (single substances approach). El documento completo puede encontrarse en la direcci\u00f3n: <a href=\"http:\/\/www.ospar.org\/documents\/dbase\/publications\/p00316_WEA%20Guidance%20Document.pdf\">http:\/\/www.ospar.org\/documents\/dbase\/publications\/p00316_WEA%20Guidance%20Document.pdf<\/a><\/p>\n<p>El estudio cl\u00e1sico de los efluentes basados en el an\u00e1lisis de compuestos individuales es una estrategia usualmente utilizada por muchas de la normativas tanto de la propia OSPAR como por diferentes directivas de la Uni\u00f3n Europea como la Directiva Marco del agua (<a href=\"http:\/\/ec.europa.eu\/environment\/water\/water-framework\/index_en.html\">2000\/860\/CE<\/a>) , el reglamento REACH (1907\/2006) o la Directiva IPPC (European Integrated Pollution Prevention and Control <a href=\"http:\/\/ec.europa.eu\/environment\/air\/pollutants\/stationary\/ippc\/index.htm\">2008\/1\/CE<\/a>). La estrategia de este acercamiento se basa en la determinaci\u00f3n de la persistencia, bioacumulacion y toxicidad (PBT-criteria) de estas sustancias presentes en el efluente. Esos valores representan el riesgo medioambiental de cada sustancia y son usados posteriormente para determinar los par\u00e1metros de calidad del agua y los valores de emisi\u00f3n.<\/p>\n<p>No obstante, a pesar de que este acercamiento mediante el estudio de sustancias individuales se considera eficaz se le reconocen algunos importantes defectos. En la actualidad se estima que en el mundo existen m\u00e1s de 50.000 sustancias distintas y aunque en la actualidad hay numerosos programas y estudios dedicados a la identificaci\u00f3n y caracterizaci\u00f3n PBT de \u00e9stas, aun hay muchas sustancias por caracterizar. Adem\u00e1s estos estudios solo se centran en las sustancias deliberadamente fabricadas, lo que implica que existen multitud de otras sustancias presentes en los efluentes y por tanto vertidas al medioambiente que nunca ser\u00e1n valoradas. Numerosos trabajos avalan el hecho de que un gran n\u00famero de sustancias peligrosas que est\u00e1n presentes en los efluentes y aguas superficiales\u00a0 no pueden ser detectadas, analizadas, identificadas y cuantificadas. Otro hecho demostrado es que este an\u00e1lisis individual de los distintos compuestos no tiene en cuenta el efecto que puede tener la mezcla de compuestos presente en la muestra medioambiental.<\/p>\n<p>Estos problemas han hecho que aumente el inter\u00e9s por el desarrollo y aplicaci\u00f3n de test para determinar PBT que puedan ser aplicados globalmente a toda la muestra en estudio ya sean efluentes, aguas superficiales o sedimentos. Estos estudios globales (denominados WEA de las siglas en ingles <strong>W<\/strong>hole <strong>E<\/strong>ffluent <strong>A<\/strong>ssessment) han sido aplicados en numerosos trabajos y se ha demostrado que las sustancias identificadas mediante m\u00e9todos anal\u00edticos podr\u00edan explicar solo una peque\u00f1a porci\u00f3n de los efectos adversos que han sido medidos en las muestras. Esto significa que una gran fracci\u00f3n de los efectos adversos del agua, agua residual y sedimentos son causados por sustancias desconocidas (no identificadas) o por el efecto combinado de estas sustancias. Estos estudios sirven para aumentar el conocimiento de los efectos combinado de todas las sustancias conocidas y desconocidas presentes en los efluentes, especialmente en las mezclas complejas.<\/p>\n<p>Las ventajas de concepto WEA ha llevado al desarrollo de este tipo de ensayos en todo el mundo y que algunos pa\u00edses como EEUU, Canad\u00e1, Alemania, Irlanda, Espa\u00f1a o Suecia, apliquen ya algunos test WEA en sus legislaciones o permisos de vertido. As\u00ed mismo dentro de la normativa IPPC el concepto WEA ha sido incluido en las estrategia de control de los efluentes en numerosas BREF (Best available technology Reference documents)\u00a0 como en la de la producci\u00f3n de compuestos org\u00e1nicos a gran escala (2003) y en qu\u00edmica fina (2006). En la mayor\u00eda de los pa\u00edses el reglamento de la aplicaci\u00f3n de m\u00e9todos WEA est\u00e1 restringido al estudio de la toxicidad aguda aunque se est\u00e1 pensando la introducci\u00f3n de otros par\u00e1metros.<\/p>\n<p>La comisi\u00f3n creada por la OSPAR para el estudio de la aplicabilidad de m\u00e9todos WEA se centro en tres aspectos.<\/p>\n<p>A. Cuando aplicar WEA<\/p>\n<p>B. Par\u00e1metros WEA a utilizar y orden<\/p>\n<p>C. Test y protocolos WEA a aplicar<\/p>\n<p>D. Aspecto pr\u00e1cticos. Manejo de las muestras, interpretaci\u00f3n de resultados.<\/p>\n<p><strong>CUANDO APLICAR WEA<\/strong><\/p>\n<p>La gran ventaja de la aplicaci\u00f3n de m\u00e9todos WEA comparado con el de sustancia individuales es que se mide el efecto combinado de todas las sustancias presentes, incluidas aquellas desconocidas o de sustancias que aun no han sido determinadas. Cuanto mayor sea la complejidad de la muestra la caracterizaci\u00f3n mediante la identificaci\u00f3n de compuestos individuales ser\u00e1 m\u00e1s incompleta y puede resultar en la emisi\u00f3n de efectos adverso para las aguas superficiales. El grupo de trabajo de la OSPAR-WEA ha desarrollado cuatro criterios para seleccionar los efluentes donde la aplicaci\u00f3n de los m\u00e9todos puede tener su mayor inter\u00e9s<\/p>\n<p><span style=\"text-decoration: underline;\">Industrias donde se prevea la presencia de efluentes complejo<\/span>. Este criterio se basa en informaci\u00f3n de la planta considerando los productos empleados y los procesos utilizados responsables de la generaci\u00f3n del\u00a0 efluente, as\u00ed como de los tratamientos que recibe el agua residual en la propia planta antes de su vertido.<\/p>\n<p><span style=\"text-decoration: underline;\">Resultados previos de m\u00e9todos WEA<\/span>. Si los resultados de los ensayos WEA usados previamente muestran la presencia de efectos adversos en el medioambiente que no pueden ser explicados mediante el an\u00e1lisis de sustancias individuales. Es necesario comprobar si esos resultados fueron puntuales o se repiten en el tiempo.<\/p>\n<p><span style=\"text-decoration: underline;\">Altos niveles de carbono org\u00e1nico total.<\/span> Altos contenidos de carb\u00f3n org\u00e1nico en el efluente indican la presencia de altos contenidos de sustancias org\u00e1nicas lo que significa que la probabilidad que el efluente pueda tener efecto adversos es m\u00e1s grande que en efluentes con bajo contenido en materia org\u00e1nica. De todas formas hay que tener en cuenta que la presencia de niveles bajos de materia org\u00e1nica en el efluente no es una garant\u00eda de la ausencia de efectos negativos; no hay un valor claro de corte para el COT o DQO ya que otros par\u00e1metros como puede ser la composici\u00f3n i\u00f3nica, la presencia de metales t\u00f3xicos o compuestos org\u00e1nicos altamente t\u00f3xicos (aunque en baja concentraci\u00f3n) como los pesticidas influyen en la toxicidad de la muestra.<\/p>\n<p><span style=\"text-decoration: underline;\">Baja calidad ecol\u00f3gica de las aguas superficiales.<\/span> Si el estado ecol\u00f3gico de las aguas superficiales es muy pobre una de las posibles causas\u00a0 es la presencia de sustancias que causen efectos adversos en uno o m\u00e1s microorganismos lo que conlleva efectos a trav\u00e9s de la cadena alimenticia que desequilibran el equilibrio ecol\u00f3gico. Los test WEA miden los efectos sobre los organismos y son un lazo de uni\u00f3n entre qu\u00edmica y ecolog\u00eda. Los test WEA podr\u00edan ser aplicados a las aguas superficiales y a los efluentes para descartar esos que necesitan ser examinados en relaci\u00f3n con el status ecol\u00f3gico.<\/p>\n<p><strong>B. QUE PAR\u00c1METROS WEA UTILIZAR Y EN QU\u00c9 ORDEN<\/strong><\/p>\n<p>Los par\u00e1metros m\u00e1s relevantes para el ambiente marino y que pueden causar efectos a largo tiempo son la persistencia, bioacumulaci\u00f3n y la toxicidad cr\u00f3nica. De todas formas la toxicidad aguda debe ser estudiada en los efluentes para agua fresca, sobre todo en los primeros estudios de muestreo<strong>.<\/strong><\/p>\n<p>Otros par\u00e1metros de importancia en el ambiente marino son los disruptores endocrinos y sustancias con efecto mutag\u00e9nicos. Estos par\u00e1metros est\u00e1n siendo determinados cada d\u00eda con mayor frecuencia en las sustancias individuales. Estos test est\u00e1n aun en desarrollo y la relevancia de estos par\u00e1metros en el impacto medioambiental est\u00e1 bajo discusi\u00f3n.<\/p>\n<p>Los ensayos WEA deben ser realizados en el orden persistencia, bioacumulaci\u00f3n, y toxicidad. Es importante que los ensayos de persistencia no sean realizados como un par\u00e1metro separado si no en combinaci\u00f3n con los otros par\u00e1metros. La secuencia comienza con los test de persistencia (test de degradaci\u00f3n) para eliminar la mayor\u00eda de las sustancias no son persistentes. Despu\u00e9s de este paso de pretratamiento la muestra tratada es usada para el estudio de la toxicidad y bioacumulaci\u00f3n. Esta combinaci\u00f3n de test revela los niveles de durabilidad de la toxicidad aguda, cr\u00f3nica y la bioacumulacion. Estos son considerados los m\u00e1s importantes ya que ocurre durante largos periodos de tiempo.<\/p>\n<p><strong>C. TEST Y PROTOCOLOS WEA A APLICAR<\/strong><\/p>\n<p><strong>\u00a0<\/strong>Para la medida de cada parametro WEA existen diferentes ensayos y m\u00e9todos en todo el mundo. Por ejemplo la toxicidad aguda con bacterias puede ser medida con diferentes especies de bacteria o pueden ser realizadas con distintos end-ponit o diferentes metodos. Cada metodo o ensayo tiene sus ventajas o relacion con el efecto del eflluente en el medioambiente, por lo tanto es necesario disponer de un conjunto de herramientas con una variedad de ensayos para cada parametro WEA a analizar que se adapte especificamente al efluente y a las agua superficiales receptoras del vertido.<\/p>\n<p>Estas herramientas se pueden dividir en dos grupos i) aquellas que son generalmente aceptads, usadas y aplicadas\u00a0 en el mundo y que son las m\u00e1s robustas y estan mejor desarrollads y ii) aquellas que contienen metodos menos aceptados y menos desarrollados pero pueden ser utiles para ocasiones especificas o que pueden ser apliacdas en un futuro pr\u00f3ximo tras un periodo de desarrollo.<\/p>\n<p><em>C-1 Breve descripci\u00f3n de los ensayos:<\/em><\/p>\n<p><em><span style=\"text-decoration: underline;\">Toxicidad aguda<\/span>. <\/em>La toxicidad aguda es el par\u00e1metro m\u00e1s ampliamente usado y desarrollado y sobre el que existe el mayor n\u00famero de protocolos disponibles. Muchos pa\u00edses aplican test de bacterias algas y crust\u00e1ceos pr\u00e1cticamente usando el mismo organismo y protocolo. Tambi\u00e9n existen test que utilizan peces pero son menos utilizados por razones \u00e9ticas y econ\u00f3micas. Dentro de estos ensayos hay test con organismos de agua dulce y con organismos marinos. Los efluentes pueden tener un car\u00e1cter salino, salobre o dulce y a su vez pueden ser vertidos en sistemas marinos, salobres o de agua dulce. Idealmente el organismo utilizado deber\u00eda estar en concordancia con el agua receptora, es decir utilizar organismos de agua dulce si el efluente se descarga en sistemas de agua dulce o organismos de agua salada si el efluente vierte en agua saladas. Cuando la naturaleza del efluente es diferente de la del agua receptora es necesario hacer una elecci\u00f3n, tambi\u00e9n si el efluente es alterado antes de su vertido (adicci\u00f3n de salinidad al agua fresca para efluentes que descarguen en el mar). \u00a0La tabla 1 extra\u00edda de la gu\u00eda de la OSPAR-WEA resume estos test as\u00ed como los pa\u00edses que los utilizan.<\/p>\n<p><a href=\"https:\/\/www.madrimasd.org\/blogs\/remtavares\/files\/2011\/12\/Tabla-1_UAH_dic.jpg\"><img decoding=\"async\" class=\"aligncenter size-medium wp-image-131707\" title=\"Tabla 1_UAH_dic\" src=\"https:\/\/www.madrimasd.org\/blogs\/remtavares\/files\/2011\/12\/Tabla-1_UAH_dic-300x162.jpg\" alt=\"\" width=\"300\" height=\"162\" srcset=\"https:\/\/www.madrimasd.org\/blogs\/remtavares\/files\/2011\/12\/Tabla-1_UAH_dic-300x162.jpg 300w, https:\/\/www.madrimasd.org\/blogs\/remtavares\/files\/2011\/12\/Tabla-1_UAH_dic.jpg 598w\" sizes=\"(max-width: 300px) 100vw, 300px\" \/><\/a><em><span style=\"text-decoration: underline;\">Toxicidad cr\u00f3nica.<\/span> <\/em>Los ensayos de toxicidad cr\u00f3nica son mucho menos comunes que los de toxicidad aguda. La comisi\u00f3n realiz\u00f3 un estudio y encontr\u00f3 hasta 15 ensayos distintos de los cuales 9 estaban estandarizados con norma ISO. Los organismos utilizados pertenec\u00edan a la familia de las bacterias, algas, crust\u00e1ceos, rot\u00edferos, biv\u00e1lvulas, echinodermata, peces y plantas. El tiempo de exposici\u00f3n var\u00eda desde las 16 horas hasta los 90 d\u00edas dependiendo del ciclo de vida del organismo. La mayor\u00eda de los test utilizan como medida la inhibici\u00f3n del crecimiento siendo la mayor\u00eda ensayos est\u00e1ticos y solo un 30% son semiest\u00e1ticos. Respecto a la naturaleza de estos, 9 pueden ser aplicados a aguas frescas y 7 a aguas salobres. La tabla siguiente extra\u00edda de la gu\u00eda de la OSPR-WEA resume estos ensayos:<\/p>\n<p><a href=\"https:\/\/www.madrimasd.org\/blogs\/remtavares\/files\/2011\/12\/Tabla-2_UAH_dic.jpg\"><img decoding=\"async\" class=\"aligncenter size-medium wp-image-131708\" title=\"Tabla 2_UAH_dic\" src=\"https:\/\/www.madrimasd.org\/blogs\/remtavares\/files\/2011\/12\/Tabla-2_UAH_dic-300x196.jpg\" alt=\"\" width=\"300\" height=\"196\" srcset=\"https:\/\/www.madrimasd.org\/blogs\/remtavares\/files\/2011\/12\/Tabla-2_UAH_dic-300x196.jpg 300w, https:\/\/www.madrimasd.org\/blogs\/remtavares\/files\/2011\/12\/Tabla-2_UAH_dic.jpg 560w\" sizes=\"(max-width: 300px) 100vw, 300px\" \/><\/a><em><span style=\"text-decoration: underline;\">Bioacumulaci\u00f3n.<\/span><\/em> Para los ensayos de bioacumulaci\u00f3n existen dos test. El m\u00e9todo LLE aplicado en Suecia de forma rutinaria y se basa en la extracci\u00f3n total de sustancias potencialmente bio acumulables incluida la fracci\u00f3n unida a las materia particulada, y el m\u00e9todo SPME este m\u00e9todo es m\u00e1s reciente y refleja m\u00e1s precisamente la posible bioacumulaci\u00f3n en el ecosistema y solo mide sustancias biol\u00f3gicamente disponibles. La tabla, extra\u00edda del documento de la OSPR-WEA resume estos ensayos.<\/p>\n<p><a href=\"https:\/\/www.madrimasd.org\/blogs\/remtavares\/files\/2011\/12\/Tabla-3_UAH_dic.jpg\"><img decoding=\"async\" class=\"aligncenter size-medium wp-image-131709\" title=\"Tabla 3_UAH_dic\" src=\"https:\/\/www.madrimasd.org\/blogs\/remtavares\/files\/2011\/12\/Tabla-3_UAH_dic-300x109.jpg\" alt=\"\" width=\"300\" height=\"109\" srcset=\"https:\/\/www.madrimasd.org\/blogs\/remtavares\/files\/2011\/12\/Tabla-3_UAH_dic-300x109.jpg 300w, https:\/\/www.madrimasd.org\/blogs\/remtavares\/files\/2011\/12\/Tabla-3_UAH_dic.jpg 598w\" sizes=\"(max-width: 300px) 100vw, 300px\" \/><\/a><em><span style=\"text-decoration: underline;\">Genotoxicidad y mutag\u00e9sis.<\/span><\/em> Existen diversos m\u00e9todos internacionalmente estandarizados para la medida de estos par\u00e1metros. La genotoxicidad mide cualquier da\u00f1o potencial sobre el material gen\u00e9tico, mientras que la mutag\u00e9nesis tiene en cuenta da\u00f1os permanentes y transmisibles en el material gen\u00e9tico.<\/p>\n<p><a href=\"https:\/\/www.madrimasd.org\/blogs\/remtavares\/files\/2011\/12\/Tabla-4_UAH_dic.jpg\"><img decoding=\"async\" class=\"aligncenter size-medium wp-image-131710\" title=\"Tabla 4_UAH_dic\" src=\"https:\/\/www.madrimasd.org\/blogs\/remtavares\/files\/2011\/12\/Tabla-4_UAH_dic-300x120.jpg\" alt=\"\" width=\"300\" height=\"120\" srcset=\"https:\/\/www.madrimasd.org\/blogs\/remtavares\/files\/2011\/12\/Tabla-4_UAH_dic-300x120.jpg 300w, https:\/\/www.madrimasd.org\/blogs\/remtavares\/files\/2011\/12\/Tabla-4_UAH_dic.jpg 598w\" sizes=\"(max-width: 300px) 100vw, 300px\" \/><\/a>\u00a0<em><span style=\"text-decoration: underline;\">Disruptores endocrinos<\/span><\/em>. Estos test son menos utilizados y est\u00e1n menos estandarizados que los de mutag\u00e9nesis y var\u00edan de pa\u00eds en pa\u00eds. Generalmente son utilizados en programas de I+D y suelen ser ensayos in vitro con c\u00e9lulas humanas o levadura modificadas y en algunos casos utilizan pez cebra.<\/p>\n<p><a href=\"https:\/\/www.madrimasd.org\/blogs\/remtavares\/files\/2011\/12\/Tabla-5_UAH_dic.jpg\"><img decoding=\"async\" class=\"aligncenter size-medium wp-image-131711\" title=\"Tabla 5_UAH_dic\" src=\"https:\/\/www.madrimasd.org\/blogs\/remtavares\/files\/2011\/12\/Tabla-5_UAH_dic-300x113.jpg\" alt=\"\" width=\"300\" height=\"113\" srcset=\"https:\/\/www.madrimasd.org\/blogs\/remtavares\/files\/2011\/12\/Tabla-5_UAH_dic-300x113.jpg 300w, https:\/\/www.madrimasd.org\/blogs\/remtavares\/files\/2011\/12\/Tabla-5_UAH_dic.jpg 574w\" sizes=\"(max-width: 300px) 100vw, 300px\" \/><\/a><\/p>\n<p><em><span style=\"text-decoration: underline;\">Persistencia<\/span><\/em>.<em> <\/em>La medida de la persistencia es un par\u00e1metro complicado, como es bien sabido de los estudios mediante compuestos individuales. Aunque para la determinaci\u00f3n de la persistencia se usa principalmente la biodegradaci\u00f3n existen otros factores como hidr\u00f3lisis que pueden afectar la persistencia de los productos qu\u00edmicos. Una de las dificultades es que la persistencia est\u00e1 definida de forma general tiempo de vida media, mientras que en realidad la persistencia representa un gradiente variando desde sustancias f\u00e1cilmente degradables (no persistentes) sustancias dif\u00edcilmente degradables (persistentes o no persistentes) y sustancias no degradables (persistentes). Estos test simulan diferentes condiciones de degradaci\u00f3n, adsorci\u00f3n y\/o reacciones qu\u00edmicas que se pueden dar en los sistemas naturales, para obtener informaci\u00f3n de los diferentes niveles de persistencia. La tabla siguiente, extra\u00edda del documento de la OPRS-WEA resume estos ensayos:<\/p>\n<p><a href=\"https:\/\/www.madrimasd.org\/blogs\/remtavares\/files\/2011\/12\/Tabla-6_UAH_dic.jpg\"><img decoding=\"async\" class=\"aligncenter size-medium wp-image-131712\" title=\"Tabla 6_UAH_dic\" src=\"https:\/\/www.madrimasd.org\/blogs\/remtavares\/files\/2011\/12\/Tabla-6_UAH_dic-300x178.jpg\" alt=\"\" width=\"300\" height=\"178\" srcset=\"https:\/\/www.madrimasd.org\/blogs\/remtavares\/files\/2011\/12\/Tabla-6_UAH_dic-300x178.jpg 300w, https:\/\/www.madrimasd.org\/blogs\/remtavares\/files\/2011\/12\/Tabla-6_UAH_dic.jpg 598w\" sizes=\"(max-width: 300px) 100vw, 300px\" \/><\/a><\/p>\n<p><strong>D. ASPECTOS PR\u00c1CTICOS<\/strong><\/p>\n<p><strong><em>D-1 Manejo y almacenamiento de las muestras<\/em><\/strong><\/p>\n<p>Existen numerosos documentos y normas que tratan sobre las t\u00e9cnicas de muestreo y manejo de las muestras de agua. Entre ellas las <em>m\u00e1s importantes son<\/em><strong><em>:<\/em><\/strong><\/p>\n<p><strong><em>\u2022<\/em> <\/strong>ISO 5667-2:1991. Water quality &#8212; Sampling &#8212; Part 2: Guidance on sampling techniques<\/p>\n<p>\u2022 <em>ISO 5667-3: 2003. Water quality &#8212; Sampling &#8212; Part 3: Guidance on the preservation and handling of water samples<\/em><\/p>\n<p><em>\u2022 <em>ISO 5667-16: 1998. Water quality \u2013 Sampling Part 16: Guidance on biotesting of samples<\/em><\/em><\/p>\n<p>La toma de muestras es considerado el paso m\u00e1s delicado en los procesos de an\u00e1lisis de efluentes porque los errores no pueden ser corregidos. Normalmente los ensayos rutinarios toman las muestras justo antes de ser vertidas (end-pipe), no obstante si se quiere determinar el origen del efecto medioambiental el an\u00e1lisis de muestras en procesos intermedios puede ser de gran utilidad. La utilizaci\u00f3n de muestreadores autom\u00e1ticos proporcionales suele ser la mejor elecci\u00f3n. Normalmente las muestras compuestas tomadas en 2 o 24 horas son m\u00e1s representativas que las muestras tomadas manualmente de forma aleatoria. Si la toma de muestras ocurre durante periodos largos de tiempo (por ejemplo 24 horas) \u00e9stas deben ser refrigeradas. El material de sistema de recogida debe ser qu\u00edmicamente inerte, f\u00e1cil de limpiar y resistente a los procesos de calentamiento y congelado. Los materiales recomendados son vidrio, polietileno o politetrafluoruroetano. Las muestras almacenadas\u00a0 entre 0 y 5 \u00b0 C en la oscuridad son estables durante 24 h. Si las muestras se congelan por debajo de \u2013 18 \u00b0C se puede alargar el periodo de conservaci\u00f3n preferiblemente hasta 2 semanas y como m\u00e1ximo dos meses seg\u00fan la norma ISO 5667-16. Es conocido que los procesos de congelaci\u00f3n y descongelaci\u00f3n de la muestras pueden (pero no siempre) resultar en una p\u00e9rdida de toxicidad. Si el proceso de descongelaci\u00f3n no se hace de forma controlada los compuestos vol\u00e1tiles se pueden eliminar. As\u00ed mismo estos procesos pueden alterar el tama\u00f1o y distribuci\u00f3n de las part\u00edculas afectando a otros ensayos posteriores. Si las part\u00edculas en suspensi\u00f3n sedimentan puede ocurrir una significativa reducci\u00f3n de la toxicidad, por lo que si se cree que \u00e9stas pueden tener una fuerte contribuci\u00f3n a la toxicidad deben realizarse ensayos que no se vean afectados por su presencia.<\/p>\n<p>El principal objetivo de los pretratamientos es que las muestras se parezcan a la inicial tanto como sea posible y modificarla lo m\u00ednimo que requiera el test a realizar. Algunas ideas sobre c\u00f3mo conseguir esto son:<\/p>\n<p>a) Las muestras congeladas deben ser descongeladas inmediatamente antes de su uso. Hay que asegurar que la muestra es homogeneizada bien agitando o sacudiendo la muestra para evitar sobrecalentamientos donde la p\u00e9rdida parcial de compuestos vol\u00e1tiles debe ser considerada.<\/p>\n<p>b) En general los bioensayos deben ser realizados con la muestra original. En algunos casos las part\u00edculas pueden afectar al comportamiento de los organismos o a los sistemas de detecci\u00f3n (p.e. fotometr\u00eda) En estos casos un paso previo de eliminaci\u00f3n de estas est\u00e1 permitido. De todas formas los procesos de eliminaci\u00f3n de las part\u00edculas llevan el riesgo de que los compuestos activos adsorbidos a las part\u00edculas son tambi\u00e9n eliminados previamente a la realizaci\u00f3n del test. El primer paso recomendado ser\u00eda dejar sedimentar las part\u00edculas de 30 minutos a 2 horas. Si las part\u00edculas no se eliminan por sedimentaci\u00f3n la centrifugaci\u00f3n es preferida a la filtraci\u00f3n. Si la filtraci\u00f3n es necesaria deben usarse filtros de fibra de vidrio.<\/p>\n<p>c) Los ensayos de degradabilidad de las aguas residuales deben realizarse preferiblemente con las muestras sin diluir para asegurar que los sucesivos ensayos de toxicidad no se vean afectados por la diluci\u00f3n. Si es necesario diluir las muestra (p.e. niveles de COT muy altos) el factor de diluci\u00f3n debe ser tenido en cuenta a la hora de interpretar los resultados.<\/p>\n<p>d) Las muestras que tengan pH extremos excediendo los l\u00edmites de tolerancia de los microorganismos deben ser neutralizados. Este paso debe ser omitido si el efecto del pH quiere ser reflejado en la toxicidad o si el ajuste del pH puede provocar reacciones qu\u00edmicas o f\u00edsicas (p.e precipitaci\u00f3n). Los vol\u00famenes de acido o bases utilizados deben se tales que el cambio de volumen sea lo menor posible. Como agentes neutralizantes se puede utilizar acido clorh\u00eddrico y hidr\u00f3xido s\u00f3dico.<\/p>\n<p>e) La toxicidad de algunas sustancias (p.e. amoniaco, sulfuros, cianuros, aminas, fenoles y \u00e1cidos org\u00e1nicos) se ve afectada por el pH. La dependencia de la toxicidad del amoniaco con el pH es muy remarcable en los estudios con peces. En los bioensayos con algas se observa un aumento del pH debido a que el CO<sub>2<\/sub> es consumido. El pH deber\u00eda ser medido y registrado durante el ensayo para una correcta interpretaci\u00f3n de los resultados. En ciertos casos se deber\u00eda considerar el ajuste del pH o la utilizaci\u00f3n de tampones.<\/p>\n<p>f) La presencia de nutrientes en el efluente podr\u00eda favorecer el crecimiento en los ensayos con algas o plantas. La presencia de organismos en las muestras podr\u00eda interferir con el organismo del ensayo mediante efectos fisiol\u00f3gicos o biol\u00f3gicos. (p.e. consumo de oxigeno por bacterias, eliminaci\u00f3n de algas o bacteria por los protozoos, infecci\u00f3n del organismo del ensayo)<\/p>\n<p>g) La presencia de part\u00edculas podr\u00eda afectar con las medidas de fluorescencia en los ensayos con la bacteria <em>Vibrio fischeri<\/em>, pueden reducir el crecimiento del alga por generaci\u00f3n de zonas de sombra y molestar los sistemas de filtraci\u00f3n en <em>daphnia<\/em> o la agallas de los peces.<\/p>\n<p>h) La absorci\u00f3n de luz puede reducir el crecimiento de algas e interferir con las medidas fotom\u00e9tricas y de luminiscencia.<\/p>\n<p><em>D-2 Expresi\u00f3n e interpretaci\u00f3n de los ensayos de toxicidad<\/em><\/p>\n<p>En los ensayos WEA los resultados de toxicidad pueden ser expresados de diferentes maneras y existen diferentes normativas oficiales:<\/p>\n<p>\u2022 <em>Guidance on statistically evaluation gives OECD (2006) and ISO (2004)<\/em><\/p>\n<p><em>\u2022 <em>ISO\/PDTS 20281: 2004 (draft). Water quality \u2013 Guidance on statistical interpretation of ecotoxicity data.<\/em><\/em><\/p>\n<p><em><em>\u2022 <em>ECETOC. Whole Effluent Assessment. Technical Report No. 94, Brussels, December 2004<\/em><\/em><\/em><\/p>\n<p><em><em><em>\u2022 <em>OECD. Current approaches in the statistically analysis of ecotoxicity data: A guidance to application. OECD Series on testing and assessment No. 54, 09-May-2006<\/em><\/em><\/em><\/em><\/p>\n<p><span style=\"text-decoration: underline;\">Umbral de concentraciones<\/span> (NOEC\/LID). Se conoce como NOEC (de las siglas en ingles No Observed Effect Concentration) el volumen de muestra (en %) que no tiene estad\u00edsticamente efectos adversos significativos. Aunque este valor es muy utilizado en los ensayos de toxicidad aguda, NOEC es usado m\u00e1s frecuentemente para expresar los efectos en la toxicidad cr\u00f3nica. Para este tipo de medida no es necesario establecer una relaci\u00f3n dosis-respuesta. Otro valor utilizado es el LID (Lowest Ineffective Dilution) que es comparable a NOEC. Se define como el inverso de la fracci\u00f3n de volumen de la muestra de agua residual a la cual no se observan efectos adversos que excedan le variabilidad del especifica del ensayo (ISO 5667-16: 1998 Annex A).<\/p>\n<p><em><span style=\"text-decoration: underline;\">Curvas concentraci\u00f3n-respuesta<\/span> (EC50, EC10, LC50)<\/em> La ECi se define como la concentraci\u00f3n de una sustancia en un medio que se espera produzca un cierto efecto en el i% de los organismos testeados de una poblaci\u00f3n bajo ciertas condiciones (IUPAC, 1993). La LC50 representa la concentraci\u00f3n del compuesto t\u00f3xico que resulta letal para el 50% de los organismos expuestos durante un per\u00edodo especificado. Estos valores se pueden determinar grafica- o estad\u00edsticamente. Se prefiere utilizar m\u00e9todos estad\u00edsticos Los valores de EC50 o LC50 se calculan normalmente a partir de curva dosis \u2013 respuesta.<\/p>\n<p><em><span style=\"text-decoration: underline;\">Unidades de toxicidad<\/span> KLa unidades de<\/em> toxicidad aguda TU<sub>a<\/sub> se define como 100\/EC50. En ensayos de toxicidad cr\u00f3nica la unidad de toxicidad TUc se define como 100\/NOEC. Los datos de toxicidad cr\u00f3nica se corresponden con el LID (LID = 1\/fracci\u00f3n de volumen; TUc = 100\/NOEC = LID. Por ejemplo si NOEC se corresponde con un 25 % volumen del efluente LID = 1\/0.25 = 4; TUc = 100\/25 = 4).<\/p>\n<p><em><em>\u00a0<\/em><\/em><\/p>\n<p><em><\/em><\/p>\n","protected":false},"excerpt":{"rendered":"<p>Este art\u00edculo es un resumen de gu\u00eda pr\u00e1ctica publicada por la comisi\u00f3n OSPAR para la establecer unas pautas que pretenden acercarse a la caracterizaci\u00f3n de los efluentes acuosos como un \u201ctodo\u201d (Whole Effluent Assessment, WEA) en vez de la forma m\u00e1s cl\u00e1sica de identificar compuesto por compuesto (single substances approach). Alice Luminita PETRE y Jose Antonio PERDIG\u00d3N MEL\u00d3N Departamento de Qu\u00edmica Anal\u00edtica e Ingenier\u00eda Qu\u00edmica, UAH\u00a0 [Alice Luminita PETRE y Jose Antonio PERDIG\u00d3N MEL\u00d3N. 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